Mutant p53 cancers reprogram macrophages to tumor supporting macrophages via exosomal miR-澳门威斯尼人
栏目:最新研究动态 发布时间:2018-07-30
TP53突变体(mutp53)参与了大多数人类癌症的发病机制。特异性的mutp53蛋白从野生型蛋白的抑癌活性中获得了致癌功能......

TP53突变体(mutp53)参与了大多数人类癌症的发病机制。特异性的mutp53蛋白从野生型蛋白的抑癌活性中获得了致癌功能(gain oncogenic functions,GOFs)。肿瘤相关的巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)是实体肿瘤的标志,通常与预后差有关。最近,美国NIH研究人员Tomer Cooks发现一种非细胞自治机制,通过这种机制,人类突变p53癌细胞可以将巨噬细胞重新编程,使之成为一种具有抑制作用的抗炎状态。携带GOF mutp53的结肠癌细胞有选择地释放富含mir -澳门威斯尼人的外泌体。通过邻近的巨噬细胞摄取这些外泌体,会触发其依赖于mir -澳门威斯尼人的重新编程,使其进入促癌状态。Mutp53-reprogammed tam与TGF-β活动增加抗炎免疫抑制作用。这些发现与结肠癌患者的低生存率有关,有力地支持了mutp53在微环境中发挥的GOF作用,在积极参与免疫系统以促进癌症进展和转移方面发挥了作用。

 

技术路线

image.png


主要结果

1 含有Mutp53的癌细胞重新编程巨噬细胞。

image.png

1 Mutp53重新编程巨噬细胞

a 不同状态下p53和不同分化状态的巨噬细胞共培养,TNF- α 和 IL-10的澳门威斯尼人官网情况。b 不同分化的巨噬细胞与HT29 (mutp53-R273H)细胞共同培养。TNF- α 和 IL-10的澳门威斯尼人官网情况。c 将共培养的巨噬细胞植入cy-3-明胶覆盖玻片48h,测定明胶降解率。d 不同状态的p53和m2巨噬细胞共培养荧光检测分析。e 酵母多糖对巨噬细胞吞噬能力的影响。f-g 不同类型的巨噬细胞的迁移(f)和侵袭(g)能力的检测。

2 肿瘤细胞外泌体中miR-澳门威斯尼人澳门威斯尼人官网、p53突变和TAM相关。

image.png

2 Mutp53中外泌体miR-澳门威斯尼人澳门威斯尼人官网显著上调

a-e 外泌体质控检测。f-g p53突变和正常癌细胞外泌体中miRNA澳门威斯尼人官网量变化。

3 Mutp53 激活 miR-澳门威斯尼人澳门威斯尼人官网促使巨噬细胞重新编程。

image.png

3 外泌体miR-澳门威斯尼人中澳门威斯尼人官网明显上升,被激活

a 突变和正常条件下的p53和不同类型巨噬细胞的miR-澳门威斯尼人澳门威斯尼人官网量变化。b 转入同等LNA-miR-澳门威斯尼人 mimic突变和正常条件下的p53癌细胞外泌体的3种miRNA 澳门威斯尼人官网量检测。c 转入同等LNA-miR-澳门威斯尼人 mimic的不同类型巨噬细胞的TNF-α 和 IL-10澳门威斯尼人官网量检测。d 加入miR-澳门威斯尼人抑制剂和类似物TNF-α, CCL2, 和 IL-10的澳门威斯尼人官网量变化。e 加入外泌体和阴性m2巨噬细胞的指定基因的澳门威斯尼人官网量变化。f 不同培养条件的miR-澳门威斯尼人的澳门威斯尼人官网量变化。

image.png

图4 Mutp53激活外泌体miR-澳门威斯尼人在TAM产生过程中发挥重要作用

a-d 结合荧光素酶报告实验检测不同p53状态下的巨噬细胞对小鼠肝和肺生长的影响。e-f 结合荧光素酶报告实验检测在m2型巨噬细胞转入LNA-miR-澳门威斯尼人对小鼠肝和肺生长的影响。


4 在结肠癌病人中p53突变和TAM显著相关。

image.png

5 Mutp53促进巨噬细胞M2极化,降低生存率

a-d Mutp53和野生型上皮免疫组化分析,和CD206、CD163的弥漫性和强免疫澳门威斯尼人官网有关。e-f p53野生型和Mutp53的大肠癌患者冷冻组织样本基因芯片分析(e)和患者生存率分析。

5 在结肠癌病人中mutp53和miR-澳门威斯尼人显著相关并使免疫相关因子TGF-β信号增强澳门威斯尼人官网。

image.png

6 在结肠癌病人中mutp53miR-澳门威斯尼人显著相关

a 27个与WT p53野生型病例和28个mutp53病例芯片分析基因澳门威斯尼人官网量变化。b 与WT p53肿瘤相比,在mutp53肿瘤中有较强的上皮细胞和基质miR-澳门威斯尼人杂化信号。c 联合检测miR- 澳门威斯尼人和CD206在携带mutp53和WT p53的散发性结直肠癌基质中的澳门威斯尼人官网。d WT p53、mutp53结肠癌病人细胞质当中的外泌体的3个miRNA澳门威斯尼人官网情况。

image.png

图7 mutp53患者免疫相关因子TGF-β信号增强澳门威斯尼人官网

a CRC病例中,WT p53、mutp53,p53的强上皮免疫澳门威斯尼人官网与FOXP3的强非上皮免疫澳门威斯尼人官网性分析。b 所有标本的FOXP3免疫丰度和强度计算分析。c-d 一般的炎症基因(c)和TGF-β信号标志基因集合(d)产生的GSEA mRNA澳门威斯尼人官网水平的分析。提出的mutp53促进肿瘤微环境的分子模型。


我是混淆代码

如果您的浏览器未跳转,请点击此处进行游戏并领取优惠

技术支持 AI智能站群 luis888.vip@gmail.com