肾小管上皮细胞的澳门威斯尼人官网CCL2对于白蛋白诱导的肾小管间质炎症是至关重要的
栏目:最新研究动态 发布时间:2018-08-22
白尿与肾小管间质炎症密切相关,但蛋白尿对肾损伤的作用机制尚不清楚。2018年3月东南大学医学院......

蛋白尿与肾小管间质炎症密切相关,但蛋白尿对肾损伤的作用机制尚不清楚。2018年3月东南大学医学院刘必成教授在J Am Soc Nephrol. (IF=8.65)上发表论文,本研究探讨了肾小管上皮细胞(TEC)澳门威斯尼人官网在小鼠肾脏损伤模型和IgA肾病患者中向巨噬细胞传递炎症信号的新作用。本研究表明,在蛋白尿肾疾病的背景下,由CCL2 mRNA包裹的TECs释放出更多的澳门威斯尼人官网,可将其传递给间质大噬细胞。TEC澳门威斯尼人官网可能是白蛋白诱导的Tu-球蛋白间炎症的一个关键机制,可以为限制CKD的进展提供新的治疗靶点。

技术路线:

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结果:

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Fig1. 在AKI模型中, CCL2mRNA的澳门威斯尼人官网增多

A 组织学(PAS染色)和免疫组织病理(CD68+免疫抑制)变化;B 炎性细胞因子mRNA的变化6)通过实时PCR在肾脏内的表达;C NGAL蛋白和基因的表达变化;D 澳门威斯尼人官网的电子显微鉴定;E WB检测澳门威斯尼人官网标志蛋白CD9、CD63;F NAT鉴定澳门威斯尼人官网;G PCR检测炎症细胞因子


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Fig2. 慢性肾病模型中CCL2mRNA释放的澳门威斯尼人官网增多。

A,B PAS和Masson染色;C PCR检测炎症细胞因子;E WB鉴定澳门威斯尼人官网;F NAT鉴定澳门威斯尼人官网;G PCR检测澳门威斯尼人官网中的炎症细胞因子


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Fig 3 与其他炎症因子相比,TEC澳门威斯尼人官网中的CCL2 mRNA含量最多

A TEC细胞中各种炎性因子miRNA表达情况;B 在TEC细胞的澳门威斯尼人官网中各种炎性因子miRNA表达情况


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Fig4. CCl 2 mRNA通过TEC澳门威斯尼人官网转移到巨噬细胞

A 在巨噬细胞中添加荧光标记的澳门威斯尼人官网;B PCR检测炎症细胞因子;C 流式细胞术显示BSA处理组巨噬细胞中荧光标记的澳门威斯尼人官网增多并被巨噬细胞吞噬;D 在mRNA水平上,siRNA在TECs和TEC澳门威斯尼人官网中有效地敲除CcL2;E TEC澳门威斯尼人官网治疗24小时后巨噬细胞进行迁移分析;用GFP标记的CCL2质粒转染TECs;G 显示在TECs、TEC外体和与TEC外体处理的RAW264.7中配对的GFP和CcL2配对引物检测GFP-CCl 2融合的mRNA水平。


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Fig 5. BSA处理的TECs澳门威斯尼人官网引起小鼠肾损伤.

A 在离体体注射12小时后,用定量RT-PCR法检测小鼠肾脏中CCR2 mRNA的表达;B PAS染色肾脏组织学表现无明显的组织学改变;C PAS染色和免疫组化;D PCR显示,与Ctrl EXO组相比,BSA离体小鼠肾脏中CCR2 mRNA的表达增加;E BSA外周小鼠NGAL表达与澳门威斯尼人官网注射后72小时CTRL EXO小鼠相比显著增加


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Fig 6从CC2敲除TECs的澳门威斯尼人官网转移减少了肾脏炎症。

A PAS染色,来自TECs的澳门威斯尼人官网与CCL2敲除(SIRNAY-TEC EXO)部分地减少了间质巨噬细胞浸润;流式细胞术证实,与接受NCX-TEC EXO处理的小鼠相比,接受siRNAE-TEC EXO的小鼠的肾脏中CD68 +巨噬细胞的浸润部分减少;C RT-PCR分析显示,CcL2和NGAL mRNA呈下降趋势,但无统计学意义;D 与NCY-TEC EXO组相比,接受siRnAE-TEC EXO的小鼠肾脏NGAL蛋白部分减少(无显著性)。


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Fig7. 澳门威斯尼人官网CCL2mRNA与IgA肾病患者的蛋白尿和管状组织炎症的严重程度相关。

A WB鉴定澳门威斯尼人官网;B NTA鉴定澳门威斯尼人官网;C 在尿液中释放的澳门威斯尼人官网的数量与蛋白尿水平密切相关;D PCR显示,与对照组相比,IgAN患者尿中的澳门威斯尼人官网CCl 2 mRNA上调;E IgAN患者肾脏中CD68 +巨噬细胞浸润的代表性图像。


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